現在市場上
日本島津色譜柱種類繁多•│☁,不同型別的色譜柱分離物件不同•│☁,因此•│☁,必須學會精準選擇液相色譜柱•│☁,在選擇色譜柱之前一定的認識和了解色譜柱的一些基本知識╃·✘·•。今天從分離模式選擇·•✘╃☁、樣品資訊·•✘╃☁、色譜柱引數等方面與大家聊一聊如何精準選擇一款合適的
日本島津色譜柱╃·✘·•。
1·•✘╃☁、分離模式
液相色譜柱種類繁多•│☁,在精準選擇液相色譜柱之前•│☁,首先必須選擇HPLC的分離模式•│☁,根據使用的固定相和流動相的組合不同•│☁,可以得到下列各種各樣的分離模式╃·✘·•。
2·•✘╃☁、瞭解樣品
瞭解待檢樣品的結構·•✘╃☁、分子量·•✘╃☁、溶解性·•✘╃☁、離子化·•✘╃☁、極性·•✘╃☁、pH值等物理化學性質•│☁,再參照下圖選擇適合的分離模式和精準的液相色譜柱固定相☁•▩·│:
3·•✘╃☁、色譜柱引數
色譜柱效能影響因素有很多•│☁,例如•│☁,矽膠純度·•✘╃☁、色譜柱尺寸·•✘╃☁、顆粒形狀·•✘╃☁、粒徑·•✘╃☁、表面積·•✘╃☁、孔徑•│☁,化學性質包括鍵合型別·•✘╃☁、碳覆蓋率·•✘╃☁、封端•│☁,下面依次介紹各引數對色譜柱效能的影響•│☁,並根據以上引數精準地選擇液相色譜柱╃·✘·•。
(1)矽膠純度
矽膠純度對強極性化合物的分離最為重要•│☁,殘留金屬離子濃度·•✘╃☁、矽膠的雜質會影響化合物的峰形•│☁,矽膠表面的金屬含量高會影響鹼性化合物的峰形•│☁,易發生拖尾╃·✘·•。
(2)色譜柱尺寸
增加色譜柱長度•│☁,可以在一定程度上提高柱效•│☁,但也會升高壓力和導致峰展寬;含量測定·•✘╃☁、溶出檢測等對於分離的要求較低•│☁,可選用較短的色譜柱•│☁,減少執行時間╃·✘·•。內徑大•│☁,提高載樣量•│☁,但也會增加橫向擴散•│☁,同樣會導致峰展寬╃·✘·•。內徑小的色譜柱靈敏度較高•│☁,峰型更窄•│☁,但是載樣量較小╃·✘·•。